药物抗肿瘤细胞多药耐药相关研究技术

概述

研究资料表明多药耐药主要分为两类：内在性，肿瘤细胞对药物不敏感；获得性，肿瘤细胞在药物的启动下产生耐药性。它主要是指肿瘤细胞一旦对某一种药物产生耐药性，对其他结构和作用机制完全不同的抗癌药物也产生交叉耐药，导致某些联合化疗方案失败，是一种光谱耐药现象。MDR酶介导机制是由MDR相关酶活性的和含量的变化而产生MDR，下面简单介绍一下有关常识。

步骤/方法：

1 我们常说的P-gp是MDR1的基因编码产物，是一种ATP依赖性膜转运蛋白。P-gp位于细胞膜，其主要功能是天然毒素，内源性代谢物及细胞毒性物质的外排。膜糖蛋白介导的药物外排机制，是指药物转运的改变，导致肿瘤细胞内药物浓度的下降，产生MDR。

2 MDR酶介导机制是由MDR相关酶活性的和含量的变化而产生MDR。TOPOⅡ是一种解旋酶，与DNA结合后解开其DNA双链，产生裂解复合物。检测细胞内药物浓度或检测相关分子的表达来研究药物的抗多药耐药作用。常用的方法：FCM（流式细胞术）高效液相法（HPLC）RT-pcr，western-blot等。

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注意事项

据有关调查中显示90%肿瘤患者死亡与其产生多药耐药有关，制备胞质膜，以硫酸亚铁钼蓝显色法测定ＡＴＰ水解产生的磷酸，并做动力学分析。样品分离转膜杂交，显色检测，流式细胞术，检测蛋白含量信息我们要重视起来。