三.生殖内分泌激素测定 包括testosterone睾酮T、LH、FSH等生殖内分泌激素。结合精液分析和体检，可以提供鉴别不育症的原因。如T、LH、FSH均低，可诊断继发性性腺功能减退症;单纯T下降，LH正常或偏高、FSH增高则可诊断为原发性性腺功能衰竭;T、LH正常，FSH升高诊断为选择性生精上皮功能不全;T、LH、FSH均增高，诊断为雄激素耐受综合征。
四抗精子抗体检查 免疫不育占男性不育症的2.7%～4%，WHO推荐混合抗球蛋白反应试验(MAR法)和免疫株试验。不但可测出不育症夫妇血清和分泌物是否存在抗精子抗体，还可测出这些抗体能否与精子结合以及区分出何种抗体与精子哪一区域结合。在抗球蛋白混合反应试验中微乳滴和活动精子结合的百分比应该小于10%。免疫株试验：把表面包被有IgA或IgG抗体的微乳滴和样本精子混合培养，抗体就会和精子表面的IgA或IgG结合。这个试验成功的关键是精子应该是能运动的。免疫株如果和超过50%的活动精子结合就可认为结果阳性，在结果阳性的病例，75%的精子常显示含有IgA或IgG。这些抗体试验结果的解释应十分小心，因为有些患者含有抗体但并不影响其生育能力。
五、特殊检查
如染色体分析、免疫学检查、输精管道造影以及睾丸活检等，以助明确不育的原因。
1.睾丸活检 对无精子症患者可以鉴别是睾丸生精障碍还是梗阻性无精子症。对重症少精子症，经一段时间治疗后精子质量不能提高的患者，可通过睾丸活检，对精子发生障碍作出定性和定量诊断。
2.输精管和精囊造影术 对于梗阻性无精子症患者可以判断梗阻部位以及输精管和精囊是否有发育异常。
3.精子功能试验
(1)精液宫颈黏液交叉试验：此试验是采集不孕夫妇的精液与宫颈黏液，分别与正常男女的宫颈黏液和精液进行体外精子穿透试验，以了解阻碍精子穿过宫颈黏液的原因在于精液还是宫颈黏液，进而可了解不孕的病因是在男方还是在女方。该试验常用体外精子穿透试验，是进行人工授精或试管婴儿前的常规检查方法。
(2)性交后试验：性交后试验是测定宫颈黏液中活动精子数，借以评价性交后若干小时内精子存活及穿透功能的试验。该项试验常在女性排卵期进行，试验前要求双方禁欲3天，性交后2～10h进行，分别取阴道后穹隆、宫颈口、宫颈管内的黏液标本检查。正常情况下，在宫颈口黏液中每视野可见到25个以上的活动力良好的精子，如果每视野下精子数少于5个，特别是活力不好、精子数量不足，提示宫颈黏液有异常或精子活力低下。如果发现白细胞较多，说明女性生殖道有炎症存在，这些情况均可影响受精，造成不孕。
(3)人精子-去透明带仓鼠卵穿透试验：简称SPA，是近年来建立的检测精子功能的重要方法。它是用仓鼠卵代替人卵，检测人精子穿入去透明带仓鼠卵的百分率，以预测人精子的受精能力，正常受精率(穿透率)≥10%，SPA阳性。
(4)人类卵细胞透明带反应试验：用无盐或含盐的透明带和已经用不同荧光素标记的精子结合，精子和透明带结合的程度可以与正常人精子的结合程度进行比较。结合的精子可以不必再进行顶体状态的测定和精子穿透透明带能力的试验。体外受精(IVF)中最成功、最有力的预测指标是精子/透明带的结合率和精子穿透透明带的比例。目前这些试验被广泛运用于临床的主要限制是没有那么多供试验用的透明带物质。但最近人们发现了一种叫ZP3的物质，它是一种存在于精子表面的蛋白质，也称透明带受体激酶ZRK(zanareceptor kinasa)，它是精子/透明带结合的最先决定物质，这使得人们可以运用ZP3代替透明带本身进行精子/透明带反应试验。
(5)人精子低渗肿胀试验(HOS)：可用于测量精子浆膜结构的完整性，是把精子放入1个低渗培养基中进行的。正常时，细胞外过多的水分移入精子的头部，使其肿胀，尾部蜷曲，这些改变在异常精子中不存在。目前诊断标准为：精子尾部低渗肿胀率≥60%为正常;
