仔细分析化验室结果和其他检查结果，诊断并不困难。主要应与单纯性肥胖症、异位ACTH样肿瘤、糖尿病、其他肾上腺皮质继发性病变相鉴别。各类皮质醇增多症的鉴别诊断见附表。
不同病因病理皮质醇增多症的实验室及X线等鉴别诊断 双侧肾上腺皮质增生（下丘脑－垂体功能紊乱） 肾上腺皮质腺瘤 肾上腺皮质癌 异位ACTH综合征 尿17－羟（mg/24小时） 一般中度增多，30mg左右 同增生 明显增高，可达50mg以上 同癌 尿17－酮（mg/24小时） 中度增多，20mg左右 可为正常或增高 明显增高，可达50mg以上 明显增高，50mg以上 血质皮醇 （μg/dl) 上午8时 30 35 35 50 下午4时 25 25~35 35 50 大剂量地塞米松抑制试验＋ 多数能被抑制，少数不能被抑制 不能被抑制 不能被抑制 不能被抑制，少数异位CRF者可被抑制 ACTH兴奋试验＋＋ 有反应，高于正常 约半数无反应，半数有反应 绝大多数无反应 有反应，少数异位ACTH分泌量特别大者无反应 甲吡酮试验＋＋＋ 有反应，常高于正常 一般无反应，少数有反应 无反应 部分有反应，部分无反应 低血钾性碱中毒 严重者可有 无 常有 常有 蝶鞍照片 小部分病人蝶鞍扩大 不扩大 不扩大 不扩大 腹膜后充气造影 肾上腺影两侧增大 一侧腺瘤影，直径一般为2~6cm 一侧癌瘤影，直径常大于6cm，但往往因有粘连，气体不能进入肾上腺区 肾上腺影两侧增大 放射性碘化胆固醇肾上腺扫描或照相 两侧肾上腺显像，增大 瘤侧显像，增大 癌侧显像，或不显影 两侧显像，增大 肾上腺超声检查及CT扫描 两侧肾上腺增大 显示肿瘤 显示肿瘤 两侧肾上腺增大 血浆ACTH测定 清晨略高于正常，晚上不像正常那样下降 降低 降低 明显增高注：＋每次2mg，每6小时口服一次，连续2日，第2日尿17－羟降至对照值的50％以下，表示被抑制。
＋＋ ACTH25u，溶于5％葡萄糖水液500ml中，静脉滴注8小时，共2日，正常人滴注日的尿17－羟基础值增加2倍以上。
＋＋＋ 甲吡酮每日2~3g ，分次口服，连续2日，第2日或停药后第1日尿17－羟或17－生酮类固醇较对照值增加一倍以上，表示有反应。