诊断：
4项主要诊断标准是：
1.骨质疏松和骨的脆性增加。
2.蓝巩膜。
3.牙质形成不全(dentinogenesis imperfecta)。
4.早熟性耳硬化(premature otoclerosis)。
上述4项中出现2项特别是前2项，即可诊断，结合影像学检查有助于诊断。
一般并不困难，有时要与严重的佝偻病相区别，佝偻病表现为骨骺软骨增宽，模糊，干骺端到钙化软骨区不规则，分界不清，干骺端本身呈杯状增宽，此外，其它骨骼的稀疏情况不及成骨不全症者明显，临床上尚应与软骨发育不全，先天性肌弛缓，甲状腺功能减退及甲旁亢等区别，一般说来并不困难。
有学者认为本病诊断关键点在于与软骨发育不全的鉴别。
软骨发育不全是一种全身对称性软骨发育障碍，主要表现为四肢粗短但躯干近乎正常的侏儒畸形，重症软骨发育不全声像图特点：胎头增大，双顶径增宽;肋骨粗短，胸廓狭小但胸廓下口相对扩大;胎儿腹部膨隆，腹围增大;胎儿四肢短小，长骨粗短且多伴有弯曲，骨端膨大;羊水量增多，这两种畸形胎儿的肢体都短小，但成骨发育不全，骨密度减低，皮质变薄，极易骨折及因骨折造成骨畸形和胸廓变形，与软骨发育不全一般无骨折相鉴别。
另外还需注意，本病由于可造成骨骼畸形及骨折，骨痂形成，故在X 线诊断上应与骨肉瘤，佝偻病，骨纤维异常增生及先天性假关节相鉴别。
1.迟发性幼年骨质疏松 普遍性骨质疏松，椎体双凹变形或扁平椎体，以及脊柱的侧后突畸形和易骨折等，与成骨不全相似;但后者尚有头大，两侧颞骨外突，扁颅底，面小呈三角形，蓝色巩膜，多发缝间骨，并有家族史等均与前者不同。
Ⅰ型OI的诊断有时十分困难，凡遇青少年骨质疏松或围绝经期出现的严重骨质疏松症均应想到Ⅰ型OI可能。
2.骨软化和佝偻病 无骨脆易折，无蓝色巩膜，矿化前沿带模糊呈毛刷状或杯口状，骺软骨盘增宽，骨软化多见于孕妇或哺乳期妇女，有骨痛，血清钙，磷均降低。
3.维生素C缺乏症 病人亦有骨质疏松，但皮下，肌间，骨外膜可有出血点，可有剧痛并可出现假性瘫痪，骨折愈合后可出现钙化。
4.骨肉瘤 成骨不全病人骨折部分可出现大量骨痂，多数为良性，仅少数有血沉和血ALP升高，必要时可行骨活检鉴别。
5.关节活动过度综合征 关节松弛和活动过度是OI的特征之一，应与引起这一改变的其他胶原缺陷性疾病如良性关节活动过度综合征，Morquio)综合征，Ehlers- Danlos综合征，Marfan综合征，Larsen综合征等鉴别，此外，特殊类型的OI可表现为Cole-Carpenter综合征，或青少年型骨质疏松，Ehlers-Danlos综合征，OI合并原发性甲旁亢，OI合并牙质生成不全(dentinogenesis imperfecta，DI)，OI样综合征，应注意鉴别。
