1.激素水平测定：血清睾酮水平正常或升高、DHT水平降低，睾酮/DHT比值增高，正常男孩的比值为12±3.1，本病患者可达35以上。LH水平正常或轻度升高，FSH半数患者升高。
2.精液分析：一般无精子发生或严重少精子，少数患者精子计数正常。
3.HCG兴奋试验：青春期前儿童疑有SRD5A2缺乏症时，应用HCG兴奋试验(HCG1500 U隔日肌注1次，连续3次)可以揭示睾酮/DHT比值增高。HCG兴奋后，6个月以内正常男婴的睾酮/DHT比值为5.2±1.5，6个月至14岁男孩为11.0±4.4。
4.尿5α和5β睾酮代谢物比值：睾酮的5α-代谢物包括DHT、雄素酮、表雄酮和5α-雄烷3α，17β-二醇，5β-代谢物包括原胆烷醇酮和5β-雄烷3α，17β-二醇。本病患者52/5β(C19-和C21-)类固醇的比值降低。
5.生殖器皮肤成纤维细胞SRD5A2活性测定：分离培养患者生殖器皮肤的成纤维细胞，测定加入睾酮后DHT的含量，可以评价SRD5A2活性。活性显著减低的病理情况除了本病外，还有完全型睾丸女性化、神经性厌食、卟啉病、甲状腺功能减退和库欣综合征等。
6.SRD5A2基因分析：证明存在酶基因突变具有病征性或诊断性意义。